油紅O染色實(shí)驗(yàn)代測(cè)

油紅O染色實(shí)驗(yàn)代測(cè)

油紅O染色簡(jiǎn)介：

油紅O對(duì)脂滴的染色機(jī)制一般認(rèn)為是物理學(xué)上的溶液作用或吸附作用，借溶液作用使脂質(zhì)染色，即油紅O先溶于60%異丙醇中，然后切片浸入油紅O染液中時(shí)，油紅O在組織脂質(zhì)的溶解度較60%異丙醇中的溶解度高，所以在染色時(shí)油紅O從60%異丙醇中轉(zhuǎn)移入脂質(zhì)中使脂滴顯示紅色。

油紅O染色步驟（僅供參考）：

1、 固定：將冰凍切片復(fù)溫干燥10min；細(xì)胞爬片4%多聚甲醛固定15min，PBS漂洗3次，5min/次。

2、 染色：入油紅O工作液孵育10-15min；細(xì)胞爬片破膜10-15min，PBS漂洗3次，5min/次，入油紅O工作液37°染色1-2h。

3、 分化：75%酒精分化2s，水洗1min。

4、 復(fù)染細(xì)胞核：Harris蘇木素復(fù)染1-2min左右，自來(lái)水洗，1%的鹽酸酒精分化數(shù)秒，自來(lái)水沖洗，氨水返藍(lán)，流水沖洗。

5、 封片：用紙巾吸去周邊水分，甘油明膠封片。

染色結(jié)果：脂滴呈橘紅色至鮮紅色，細(xì)胞核藍(lán)色。

注意事項(xiàng)：

1、油紅O是對(duì)脂類(lèi)物質(zhì)進(jìn)行染色，石蠟切片在處理過(guò)程中脂類(lèi)物質(zhì)無(wú)法保存，所以石蠟切片不能進(jìn)行油紅O染色。

2、油紅O染液使用一段時(shí)間后，染出的脂滴顏色會(huì)偏黃，此時(shí)就需要更換染液。

3、油紅染色時(shí)，動(dòng)作要輕，因?yàn)橹我滓莆唬⑶以诜馄瑫r(shí)應(yīng)避免蓋玻片滑動(dòng)；

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