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AB-PAS染色實(shí)驗(yàn)代測(cè)

某些細(xì)胞如胃腸的杯狀細(xì)胞能分泌粘稠的分泌物，含有大量的糖稱粘多糖。中性粘液物質(zhì)含有氨基己糖和游離的己糖基，酸性粘液物質(zhì)也含有氨基己糖并含有各種酸根。此方法先染阿利新藍(lán)染酸性粘液物質(zhì)為藍(lán)色，并阻斷酸性粘液物質(zhì)的羧酸分子中的乙二醇被高點(diǎn)酸氧化生物試劑二醛而著紅色。只有中性粘液物質(zhì)的乙二醇基被高點(diǎn)酸生成二醛后與雪夫試劑中的無(wú)色品紅作用生成紅紫色復(fù)合物。

服務(wù)說(shuō)明

染色實(shí)驗(yàn)步驟：

1、切片脫蠟至水。

2、阿利新藍(lán)染液浸染或滴染5-10min。稍水洗。

3、0.5%高點(diǎn)酸水溶液氧化5-10min。

4、流水沖洗數(shù)分鐘蒸餾水換洗兩次。

5、雪夫試劑暗處浸染或滴染15~30min。

6、流水沖洗5-10min。  

7、蘇木素復(fù)染核1min左右，鹽酸酒精分化，氨水返藍(lán)。

8、95%酒精I(xiàn) 5min-95%酒精I(xiàn)I 5min-無(wú)水乙醇I 5min-無(wú)水乙醇II 5min脫水，二甲苯透明中性樹(shù)膠封固。（一定要濕封，在組織上的二甲苯未揮發(fā)完組織變干之前封片，否則易出現(xiàn)黑色的結(jié)晶狀物即空氣結(jié)晶）。

AB-PAS染色實(shí)驗(yàn)代測(cè)

染色結(jié)果：

糖原、中性粘液物質(zhì)呈紅色，酸性粘液物質(zhì)呈藍(lán)色，混合性粘液物質(zhì)呈藍(lán)紫色或紫藍(lán)色，胞核呈藍(lán)色。

注意事項(xiàng)

1、高點(diǎn)酸溶液為透明溶液，長(zhǎng)時(shí)間染色如果沒(méi)有帶入雜質(zhì)的話此溶液一直是透明的，所以無(wú)法從常規(guī)的顏色辨別高點(diǎn)酸的好壞，只有定期更換，根據(jù)標(biāo)本的多少1~2月更換一次。

2、雪夫試劑要放入冰箱保存，臨用前半小時(shí)取出恢復(fù)至室溫，用后又倒回原瓶?jī)?nèi)放冰箱保存；雪夫試劑出現(xiàn)淡紅色就不能繼續(xù)使用了。

3、如果沒(méi)有要求，可以不染核，要染核的話染色一定要淺。因?yàn)樗嵝哉骋何镔|(zhì)著藍(lán)色，如果核藍(lán)色太深對(duì)比不明顯。

4、一定要先染阿利新藍(lán)后染PAS，否則藍(lán)色著染少而淺結(jié)果不準(zhǔn)確，原因是酸性粘液物質(zhì)的羧酸分子中的乙二醇被高點(diǎn)酸氧化生物試劑二醛與雪夫試劑中的無(wú)色品紅作用生成紅紫色復(fù)合物后再難跟阿利新藍(lán)結(jié)合。