植物總糖和還原糖（檢測服務(wù)）

服務(wù)介紹：

植物總糖和還原糖檢測試劑盒(DNS比色法)檢測原理是還原糖在堿性加熱條件下被氧化成糖酸，3,5-二硝基水楊酸被還原為棕紅色的氨基化合物，在一定范圍內(nèi)還原糖的量與棕紅色產(chǎn)物的顏色深淺程度呈一定比例關(guān)系，在540nm處用分光光度計(jì)測定棕紅色物質(zhì)的吸光度，該吸光度值與還原糖含量呈線性關(guān)系，利用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中的還原糖和總糖的含量。

背景介紹：

還原糖是指具有還原性的糖類。在糖類中，分子中含有游離醛基或酮基的單糖和含有游離醛基的二糖都具有還原性。例如，葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麥芽糖等都是還原糖。還原糖的主要特性是它們能夠被特定的化學(xué)試劑（如Fehling試劑、Benedict試劑、二硝基水楊酸（DNS）試劑等）氧化，并產(chǎn)生明顯的顏色變化。這種反應(yīng)通常用于檢測樣品中還原糖的存在和含量。

操作步驟（僅供參考）：

還原糖的提取：

①稱取植物樣品0.5~3g，剪碎，加入蒸餾水約3ml勻漿，轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中，用12ml蒸餾水沖洗研磨器2~3次，洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器。

②50℃水浴30min，并不時攪拌，以便還原糖徹-底浸出。

③將沉淀和浸出液轉(zhuǎn)移至50ml離心管，4000g離心5min。

④留取上清液，向沉淀中加入20ml蒸餾水，混勻，再次4000g離心5min。

⑤留取上清液，將2次獲得的上清液合并，用蒸餾水定容至100ml(提取液)，混勻，作為還原糖待測液。

總糖的水解和提取：

①稱取植物樣品0.5~3g，剪碎，加入蒸餾水約3ml勻漿，轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中，用12ml蒸餾水沖洗研磨器2~3次，洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器。

②向容器中加入10ml 6M鹽酸溶液，攪拌均勻，煮沸30min，并不時攪拌。

③取2滴滴加于載玻片上，滴加1滴顯色液(約50ul)，檢查水解是否完-全，如已經(jīng)水解完-全，則不顯示藍(lán)色。

④水解完畢后，冷卻至室溫，加入6M氫氧化鈉溶液，使溶液pH至7.4，用蒸餾水定容至100ml，混勻，4000g離心5min。

⑤取上清或?yàn)V液10ml，用蒸餾水定容至100ml，成稀釋10倍的總糖水解液(提取液)，取0.5ml總糖水解液，測定其還原糖的含量。

稀釋葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)：取干凈離心管，按下表操作，依次獲得系列濃度的Glu標(biāo)準(zhǔn)。

加樣：取5ml離心管，按照下表設(shè)置空白管、標(biāo)準(zhǔn)管、測定管，溶液應(yīng)按照順序依次加入，并注意避免產(chǎn)生氣泡，小心混勻；如果樣品中的糖濃度過高，可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定，樣品的檢測最好能設(shè)置2~3平行管，求平均值。

還原糖測定：混勻，以空白管調(diào)零，比色杯光徑1cm，分光光度計(jì)測定540nm處標(biāo)準(zhǔn)管、測定管的吸光度。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：全自動生化儀檢測后導(dǎo)出結(jié)果，結(jié)果由EXCEL形式發(fā)送。

送樣須知：

1.南京和上海地區(qū)的客戶可提供上門取樣服務(wù)，提前一天聯(lián)系

2.外地客戶可郵寄樣本，樣本運(yùn)輸應(yīng)符合一般的生物學(xué)要求，密封加冰袋或者干冰運(yùn)輸

3.若細(xì)胞、血清、組織樣本具有潛在的傳染性或致病性，請務(wù)必提前告知

4.測試結(jié)束提供實(shí)驗(yàn)報告后，樣本可以保留1個月，若需保留樣本或者回收樣本請?zhí)崆案嬷?/span>

備注：本公司對客戶的項(xiàng)目的專有技術(shù)和資料（包括實(shí)驗(yàn)方案，測試結(jié)果，樣本等）負(fù)有絕對保密的責(zé)任。

僅供科研實(shí)驗(yàn)用，不做其他用途！

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