影響ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果的外在因素及解決方法

信帆生物為大家分享：外源性ELISA結(jié)果出錯(cuò)解決方案:

外源性物質(zhì)干擾解決方案：

外源性物質(zhì)常常是由于用于 ELISA 測定的血標(biāo)本的采集、貯存等不當(dāng)所致。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存過久、標(biāo)本凝集不全和采血管中添加物等影響。

（1）標(biāo)本溶血  由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血，均可因紅細(xì)胞破壞溶解時(shí)釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白，在以辣根過氧化物酶為標(biāo)記的 ELISA 測定中，會(huì)導(dǎo)致非特異性顯色，干擾測定結(jié)果。為克服上述干擾作用，標(biāo)本采集時(shí)必須注意避免溶血。

（2）標(biāo)本受細(xì)菌污染  因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶，因此，被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣，亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結(jié)果（信帆生物）。

（3）標(biāo)本保存不當(dāng)  在冰箱中保存過久的標(biāo)本，血清中 IgG 可聚合成多聚體、AFP 可形成二聚體，在間接法 ELISA 測定中會(huì)導(dǎo)致本底過深、甚至造成假陽性；標(biāo)本放置時(shí)間過長（如一天以上），有時(shí)抗原或抗體免疫活性減弱，亦可出現(xiàn)假陰性。為克服上述干擾，ELISA 測定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集；如不能立即測定，5 天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可存放于 4℃，1 周后測定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存；凍存后融解的標(biāo)本，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混合后再測定，但混勻時(shí)應(yīng)輕柔，（上海信帆生物）不可強(qiáng)烈振蕩。

（4）標(biāo)本凝集不全  在沒有促凝劑和抗凝劑存在的情況下，正常血液采集后 1/2~2 h 開始凝固，18~24 h *凝固。上海信帆生物提供ELISA樣本收集方法。研究檢驗(yàn)工作中，有時(shí)為了爭取時(shí)間快速檢測，常在血液還未開始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清，此時(shí)的血清中仍殘留部分纖維蛋白原，在 ELISA 測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊，易造成假陽性結(jié)果；這類情況于次日復(fù)查時(shí)因血凝已*，血清中不再有纖維蛋白原存在，故復(fù)查結(jié)果變?yōu)殛幮浴楸苊馍鲜龈蓴_作用，解決的辦法是血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清，或標(biāo)本采集時(shí)用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?/p>

（5）標(biāo)本管中添加物質(zhì)的影響  抗凝劑（如肝素，EDTA）、酶抑制劑（如 NaN3 可抑制 ELISA 系統(tǒng)中辣根過氧化物酶活性）及快速分離血清的分離膠等均對(duì) ELISA 測定有一定干擾作用。 綜上所述，對(duì)研究檢驗(yàn) ELISA 測定中出現(xiàn)的假陽性或假陰性結(jié)果，在考慮試劑因素和操作因素之外，更多的應(yīng)從標(biāo)本因素方面進(jìn)行分析，并應(yīng)采取相應(yīng)措施排除 干擾作用，從而為研究提供正確可靠的檢測結(jié)果。

上海信帆生物公司主要代理產(chǎn)品：
ELISA試劑盒：進(jìn)口ELISA試劑盒,國產(chǎn)ELISA試劑盒,人elisa試劑盒，大鼠ELISA試劑盒，小鼠ELISA試劑盒等。
培養(yǎng)基：微生物培養(yǎng)基,顯色培養(yǎng)基,BD培養(yǎng)基,gibco培養(yǎng)基等。
血清：胎牛血清,科研血清,動(dòng)物血清，NQBB,Hyclone，Gbico原裝血清 。
生物試劑：Amresco,Sigma,ABM,BIO-RAD,BD,ABCAM等進(jìn)口試劑。
標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品：進(jìn)口對(duì)照品,進(jìn)口對(duì)照藥材,進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)品.
抗體：一抗,二抗，流式抗體等。
放免代測服務(wù)：進(jìn)口放免代測服務(wù)，國產(chǎn)放免代測服務(wù)，進(jìn)口美國鳳凰等放免代測服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)室代測服務(wù)：放免代測，WB實(shí)驗(yàn)，免疫組化代測，熒光定量PCR代測，病理細(xì)胞染色代測，生化實(shí)驗(yàn)代測等。