信帆生物為大家分享：免疫組化實驗中消除非特異性背景著色

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 消除非特異性背景著色

非特異性著色zui常見的情況是蛋白質（抗體）吸附到組織切片中高度荷電的膠原及結締組織成分上，防止非特異性背景著色的方法之一是在滴加一抗前在標本上加一種無關的蛋白質溶液，封閉荷電點不給一抗留有吸附余地，以保證一抗不會吸附到膠原纖維及結締組織成分上。zui常用的無關蛋白質溶液是所用二抗的同種動物非免疫血清。用產生二抗的同種動物血清，是為了避免二抗與預先加入的蛋白質結合引起假陽性染色。
用來阻斷非特異性結合的血清不能有任何溶血現象。紅細胞破裂會使其中的過氧化酶與底物作用，產生非抗原特異性的陽性著色。多克隆抗體因其成分復雜，更易造成背景染色。稀釋液采用含 1%BAS pH7.4 的 PBS ，同時在洗液中加入 0.05%的吐溫 20 （ Tween20 ）有助于消除背景染色。

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