基質金屬蛋白酶MMP2/9明膠酶譜法試劑盒操作原理

   基質金屬蛋白酶MMP2/9明膠酶譜法試劑盒采用酶譜法(zymography)檢測MMP-2、MMP-9 活性。Zymography 是一種廣為使用的、基于SDS-PAGE 電泳和反相凝膠染色的蛋白酶檢測方法，其靈敏度可達1 nM，高于ELISA。

    其基本原理和程序是：制備加有膠原酶底物的SDS-PAGE 凝膠，含蛋白酶的樣品在此凝膠中進行電
泳， 電泳結束后取出凝膠與酶反應Buffer 孵育，凝膠染色與脫色。凝膠中由于含底物蛋白而被深
染，形成深色背景，但在有蛋白酶條帶的位置，蛋白酶將降解凝膠中的底物蛋白，因而不被染色
而形成透亮區域，從而能同時指示MMP-2、MMP-9 的大小位置(酶譜)及活性。

    本試劑盒提供MMP-2、MMP-9 特異蛋白底物及酶學反應緩沖液，可檢測少至0.1~0.5 μl 血液中的MMP-2、MMP-9 酶譜及活性，檢測靈敏度~1 nM。試劑盒可進行50 次標準小膠檢測，如果小膠加樣孔為10~15個，則總計可檢測500~750 個樣品。