差速離心法和速率區帶離心法的區別與聯系

    大多數科研客戶在取血清或者是上清的時候，都需要離心！那咱們就來著重討論一下差速離心法和速率區帶離心法，這兩種詳細方法的介紹！

   （一）差速離心法

　　它利用不同的粒子在離心力場中沉降的差別，在同一離心條件下，沉降速度不同，通過不斷增加相對離心力，使一個非均勻混合液內的大小、形狀不同的粒子分部沉淀。操作過程中一般是在離心后用傾倒的辦法把上清液與沉淀分開，然后將上清液加高轉速離心，分離出第二部分沉淀，如此往復加高轉速，逐級分離出所需要的物質。

　　差速離心的分辨率不高，沉淀系數在同一個數量級內的各種粒子不容易分開，常用于其他分離手段之前的粗制品提取。

　　（二）速率區帶離心法

　　速率區帶離心法是在離心前于離心管內先裝入密度梯度介質（如蔗糖、甘油、KBr、CsCl等），待分離的樣品鋪在梯度液的頂部、離心管底部或梯度層中間，同梯度液一起離心。離心后在近旋轉軸處（X 1 ）的介質密度zui小，離旋轉軸zui遠處（X 2 ）介質的密度zui大，但zui大介質密度必須小于樣品中粒子的zui小密度，即ρ P ＞ρ m 。這種方法是根據分離的粒子在梯度液中沉降速度的不同，使具有不同沉降速度的粒子處于不同的密度梯度層內分成一系列區帶，達到彼此分離的目的。梯度液在離心過程中以及離心完畢后，取樣時起著支持介質和穩定劑的作用，避免因機械振動而引起已分層的粒子再混合。

　　由于ρ P ＞ρ m 可知S＞0，因此該離心法的離心時間要嚴格控制，既有足夠的時間使各種粒子在介質梯度中形成區帶，又要控制在任一粒子達到沉淀前。如果離心時間過長，所有的樣品可全部到達離心管底部；離心時間不足，樣品還沒有分離。由于此法是一種不*的沉降，沉降受物質本身大小的影響較大，一般是應用在物質大小相異而密度相同的情況。常用的梯度液有Ficoll、Percoll及蔗糖。

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