上海信帆生物供應低密度脂蛋白膽固醇測試盒，提供LDL-C實驗代測服務

低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)測試盒說明書

（直接法）

一、試劑組成及配制(100 管/96 樣)：

三、測定步驟：

1、樣本處理:

①、血清(漿)：直接測定，如超過線性范圍用生理鹽水稀釋后測定。

②、培養液樣本：吸取培養液，1000 轉/分，離心 10 分鐘，取上清測定。

[注]：一般建議細胞密度在 100 萬個/ml 以上。

③、組織樣本：準確稱取組織重量,按重量(g)：體積(ml)=1：9 的比例，加入 9 倍體積的勻漿介 質，冰水浴條件下機械勻漿，2500 轉/分，離心 10 分鐘，取上清液待測。

[注]:1、如組織樣本為非高脂樣本，勻漿介質統一用磷酸鹽緩沖液(0.1mol/L pH 7.4)或生理鹽水進行提取。 2、如組織樣本為高脂樣本或部分為高脂樣本，勻漿介質可統一用無水乙醇進行提取。

④、細胞樣本：

A、細胞收集:將制備好的細胞懸液取出，1000 轉/分，離心 10 分鐘，棄上清液，留細胞沉 淀；用等滲緩沖液（推薦 0.1mol/L 、pH7～7.4 磷酸鹽緩沖液）清洗 1～2 次，同樣 1000 轉/分，離心 10 分鐘，棄上清液，留細胞沉淀；

B、細胞破碎:加入 0.2～0.3ml 的勻漿介質（推薦 0.1mol/L、pH7～7.4 磷酸鹽緩沖液或生理 鹽水）進行勻漿，冰水浴條件下超聲破碎(功率：300W,3～5 秒/次，間隔 30 秒，重復 3～ 5 次)或手動勻漿，制備好的勻漿液不離心待測。也可采用裂解液裂解(推薦 TritonX-100，

1～2%，裂解 30～40 分鐘)，裂解好的液體不離心直接測定

[注]：一般建議細胞密度在 100 萬個/ml 以上。破碎好的液體可顯微鏡觀察細胞是否破碎*

1、試劑空白管吸光度≤0.050（光徑 0.5cm）。

2、靈敏度：測試 2.6mmol/L 被測物時，吸光度差值△A 為 0.180～0.280

3、線性范圍：2～12mmol/L，r2＞0.995

4、精密度：變異系數≤8%，批間差：相對偏差≤10%

5、穩定性：原包裝試劑盒在 2℃～8℃避光保存，有效期為 12 個月。開啟后 2℃～8℃避光保存， 可穩定一個月。

四、注意事項:

1、本產品僅用于科研，不得用于研究診斷，切勿服用。

2、樣品含量如超出檢測范圍上*，可用生理鹽水稀釋樣本后進行測定，測定結果乘以稀釋倍數。

3、試劑防止葡萄糖、膽固醇等試劑的污染。

4、試劑與樣本量可按照比色杯體積，按比例增減。

2、樣品含量如超出檢測范圍上*，可用生理鹽水稀釋樣本后進行測定，測定結果乘以稀釋倍數。

3、試劑防止葡萄糖、膽固醇等試劑的污染。

4、試劑與樣本量可按照比色杯體積，按比例增減。

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